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閱讀次數(shù)：1267 發(fā)布時(shí)間：2013/7/11 9:58:25
恒遠(yuǎn)發(fā)布抗磷脂抗體檢測(cè)方法
檢測(cè)APLA*敏感試驗(yàn)是1983年介紹的ACLA的檢測(cè)，后來(lái)這種方法得到不斷改進(jìn)，血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）：用純心磷脂的無(wú)水乙醇溶液（50／11）包被聚苯乙烯反應(yīng)板，4~C過(guò)夜；常規(guī)方法洗滌后，用10％的BSA封閉；加l：50稀釋的待測(cè)血清，37~C孵育30rain；洗板后，再分別加入HRP標(biāo)記的抗人γ（1：1 500）、抗α（1：1 000）、抗μ（1；8 000）鏈的F（ab）2片段，37℃30min然后，OPD顯色，加終止液。492nm波長(zhǎng)測(cè)吸光度值。結(jié)果以正常對(duì)照組平均值±2S為正常上下限。
這種以心磷脂作為靶抗原的ELISA方法，由于交叉反應(yīng)，ACLA可能會(huì)與其他磷脂結(jié)合。
操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng)：避免脫補(bǔ)體作用（加熱血清至56℃），否則會(huì)引起假陽(yáng)性結(jié)果；反復(fù)凍融樣本也會(huì)導(dǎo)致ACLA結(jié)合力下降；微孔板也很重要。并且，在包被心磷脂同一板上，還可通過(guò)比較加和不加β2-GPI兩微孔問(wèn)的結(jié)合活性，區(qū)別β2-GPI依賴與不依賴的ACLA。
流式細(xì)胞術(shù)亦被應(yīng)用于ACLA的檢測(cè)，可同時(shí)檢測(cè)APLA同種型。
抗磷脂抗體包括狼瘡抗凝物質(zhì)和抗心磷脂抗體。它可作為抗磷脂綜合癥中的重要自身抗體，其中抗心磷脂抗體（ACA）*為常見(jiàn)。可分為IgG、IgA、IgM三類。臨床意義：1．抗心磷脂抗體陽(yáng)性提示動(dòng)、靜脈血栓形成，腦血管意外發(fā)生率高達(dá)56%。2．抗心磷脂抗體與SLE密切相關(guān)。雙型或三型陽(yáng)性SLE病人均會(huì)出現(xiàn)血栓、血小板減少性紫癜、繼發(fā)性貧血等癥狀。3．抗心磷脂抗體陽(yáng)性的女性患者易發(fā)生習(xí)慣性流產(chǎn)。
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